Method for production of GDP-L-fucose by overexpression of NADPH-regenerating and guanosine nucleotide biosynthetic enzymes in recombinant Escherichia coli

Nadph 및 구아노신 누클레오타이드 생합성 효소의 추가 발현에 의한 재조합 대장균에서 gdp-푸코즈의 생산방법

Abstract

본 발명은 GDP-푸코즈의 합성 경로를 매개하는 관련 효소의 과발현에 덧붙여, 글루코오스-6-포스페이트-데하이드로지나아제 또는/및 구아노신-이노신 키나아제를 특이적으로 추가하여 과발현하도록 재조합한 대장균을 이용하여 GDP-푸코즈를 생산하는 방법에 관한 것으로, 대장균 내에 존재하는 대표적인 NADPH 재생산효소인 글루코오스-6-포스페이트 데하이드로지나아제(glucose-6-phosphate dehydrogenase; G6PDH)와 ManB, ManC, Gmd 및 WcaG를 동시발현한 재조합 대장균을 이용하여, pH-스탯(pH-stat) 방식의 유가식 배양에서 최대 235.2±3.3mg/L의 GDP-푸코즈를 생산하였는데, 이는 G6PDH를 추가발현하지 않은 재조합 대장균에 비해 21% 향상한 결과이다. 또한, 구아노신-이노신 키나아제(guanosine-inosine kinase; Gsk)를 추가발현한 재조합 대장균을 이용하여, pH-스탯 방식의 유가식 배양에서 최대 305.5±5.3mg/L의 GDP-푸코즈를 생산하였는데, 이는 Gsk를 추가발현하지 않은 재조합대장균보다 58% 향상된 결과이다. G6PDH, GDP-L-fucose, Gsk, GTP, NADPH, 대장균, 유가식 배양, 푸코즈

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    Title
    Applied Microbiology and Biotechnology. 2007, Vol. 74, No. 4, pp. 768-775*
    Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology. 2000, Vol. 25, No. 4, pp. 213-217*

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